对于刚使用的液相色谱柱应该怎么进行维护

更新时间:2022-07-08      点击次数:1033
液相色谱柱是一种用于液体色谱分析仪器。Kromasil系列液相色谱柱具有重现行性好,使用寿命更长的特点,更好的满足制药企业和药物研发对液相色谱柱的严格要求。Kromasil是一种高纯度、大比表面积、高机械强度、较高的碳链覆盖率的新一代球形硅胶填料。金属不纯物含量极低,减少了有些螯合物在硅胶基质柱上的络合作用。 Kromasil的表面有*的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在高或低的pH条件下不易水解和分解。它允许流动相pH为1.5-9.5。
新的液相色谱柱应该怎么进行维护?
新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单,多进几次样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。如果要加快平衡时间,把前面用来平衡的进样样品浓度加大,或者不等洗脱完成,连续进样多针。用待测物对新柱平衡,目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。
影响因素:
A:物理因素
1.硅胶纯度--填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
2.色谱柱尺寸--填料床的长度和内径
3.颗粒形状--球型或不规则型
4.粒径--平均颗粒直径,通常3-10μm
5.表面积--颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示
6.孔径--颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300Å
B:化学性质
1.键合类型--单体键合-键合相分子与基体单点相连
2.碳覆盖率--与基体物质相连的键合相的量
3.封端--键合步骤之后,用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来
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