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液相色谱柱关于尺寸的选择说明
点击次数:2865 发布时间:2018-07-09
  
  
  现代液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。
  
  液相色谱柱根据功能分为HPLC和UHPLC、UPLC柱,根据内径大小又有常规分析柱,窄径柱和毛细管柱的类型区别,其中应用广泛的液质联用仪就是用的窄径柱。因为分析类的仪器主要致力于对样品成分的判断,就需要能够准确分离少量样品的内径较小的色谱柱。而内径孔大的色谱柱用于进样量大的成品纯化和分离。
  
  液相色谱柱尺寸选择:
  
  较长的液相色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低,可选用较短的液相色谱柱,减少运行时间;有关物质一般选择较长的色谱柱,提高分离效果。
  
  内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但是载样量较小。如果载样量满足要求,需要更高更尖锐的峰提高灵敏度,可以选择更小内径。但是如果进样量超过了柱载样量,色谱峰将极大变宽。所以应在灵敏度和载样量之间综合衡量。
  
  粒径小的色谱柱分离度较好,色谱柱压力更大。如果5μm粒径的色谱柱分离度稍有不足,则同型号3μm色谱柱的分离度一般会提供令人满意的选择性。
  
  如果选择较小尺寸的液相色谱柱,应衡量柱外死体积对柱效的影响,柱外死体积包括连接管线、进样体积、色谱柱接头与色谱柱连接处的空隙等。所以一般超液相使用的色谱柱不适用于常规液相仪。小规格色谱柱使用同一品牌的仪器,减少连接处空隙引入的死体积。
  
  
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